Sangmi Lee

• Ekeberg, Dag; Lee, Sangmi; Lindahl, Sofia Helena & Vethe, Nils Tore (2025). Utvikling og innledende validering av metode for kvantitativ bestemmelse av terapeutiske monoklonale antistoffer i biologiske prøver med LC-QTOF-MS. Norges miljø- og biovitenskapelige universitet (NMBU). Full text in Research Archive Show summary

  Monoklonale antistoffer har blitt bredt implementert i klinisk bruk, spesielt i behandlingen av kreft og autoimmune sykdommer, fordi de har lav toksisitet og høy selektivitet for målproteinene. Konsentrasjonen av mAb legemidlet i blodet kan imidlertid variere mellom pasienter, og hvis legemidlet har et smalt terapeutisk område, kan terapeutisk legemiddelmonitorering (TDM) utføres for å opprettholde legemiddelkonsentrasjonen innenfor det terapeutiske området for å minimere kliniske bivirkninger og øke den terapeutiske effekten. For å legge til rette for TDM, må det utvikles metoder for kvantifisering av legemidler i blod eller andre matriser. I denne masteroppgaven ble det utviklet en metode for kvantifisering av trastuzumab og bevacizumab i humant blod plasma. Prøvematrisen fokuserte på etylendiamintetraeddiksyre (EDTA)-antikoagulert plasma, men autonorm og humant serum ble også brukt som prøvematriser under metodeutviklingen for å sammenligne resultater med EDTA plasma. Prøveprepareringen var enkelt og besto av tre trinn: proteinutfelling, fordøyelse og stoppe fordøyelsen. For å redusere kompleksiteten til prøven ble det utført to sentrifugeringer: en etter proteinutfelling og en etter at fordøyelsen var stoppet. Etter prøveprepareringen ble prøven analysert ved LC-QTOF-MS som var optimalisert for de aktuelle analyttene. Dårlig trypsineringen ble observert i EDTA plasma, noe som resulterte i lav respons av mAbs etter analyse. Flere eksperimenter ble utført og observert at tilsetning av kalsiumioner forbedret trypsineringen i EDTA plasma sammenlignet med fravær av kalsiumioner. Måleområdet for trastuzumab og bevacizumab var 2 – 200 μg/mL, og det ble observert en korrelasjon mellom konsentrasjonen av mAb og responsen av mAb. Derfor var den lave deteksjonen av trastuzumab og bevacizumab mulig til 2 μg/mL og 4 μg/mL, henholdsvis, men responsen til analytter i blank prøver bør alltid evalueres. Siden denne masteroppgaven fokuserte på metodeutvikling, ble det ikke gjennomført en fullstendig validering av den analytiske ytelsen.

View all works in NVA