Eksperiment med gibberellin

Amylase

Produksjon av alfa-amylase i halvkorn fra bygg

 Halvkorn uten gibberellin
 Halvkorn med gibberellin
 Den ene halvdelen av byggkorn uten embryo plasseres med snittflaten mot en agar som inneholder stivelse i petriskåler. Skålen til høyre inneholder i tillegg 0.00005 M gibberellin (GA3). Etter 2 dager farges stivelsen i skålene ved å dyppe dem i en løsning med jod/kaliumjodid (giftig). På skålen til høyre blir det klare felter der hvor stivelsen er brutt ned av alfa-amylase. Syntesen av alfa-amylase og andre hydrolyttiske enzymer induseres av gibberellin produsert i embryo under frøspiringen. Ved å fjerne embryo og kunstig tilføre gibberellin får man den samme effekten. Kontrollskål uten gibberellin til venstre. Et lite klart felt rundt halvkornene på skålen til venstre skyldes beta-amylase som finnes i uspirt frø.

Bygg (Hordeum vulgare)

Byggkornet er en karyopse (skallfrukt) hvor fruktveggen har vokst sammen med frøskallet. Innenfor frøskallet ligger et aleuronlag bestående av 2-4 lag med levende celler og som omgir endospermen (frøhviten). Endospermen består av døde celler som inneholder vesentlig stivelseskorn, men også protein og fett, omgitt av cellevegger. Embryo ligger i den ene enden av kornet og grenser mot endospermen via et oppsugningsorgan kalt skutellum. Ved frøspiring vil embryo og skutellum lage gibberellin som diffunderer til aleuronlaget. Gibberellin induserer aleuronlagscellene til å produsere og skille ut a-amylaseb-amylasea-amylase og andre hydrolyttiske enzymer som bryter ned endospermen. Sukker, aminosyrer og andre nedbrytningsprodukter suges opp av skutellum og fraktes til embryo som utvikles til frøplante. Stivelsen brytes ned av a- amylase og b-amylase. bryter ned stivelsen inne i stivelsesmolekylene og lager oligosakkarider. spalter stivelsesmolekyler og oligosakkarider fra enden av molekylet og lager maltose (et disakkarid). Maltase omdanner maltose til glukose. Noe b-amylase finnes i tørt frø. Gibberellin øker transkripsjonen av genet for a-amylase. Halvkorn av bygg uten embryo som settes ned på en agarplate som inneholder stivelse med og uten gibberellin kan brukes til å studere induksjonen av amylase.

 Snitt gjennom byggkorn
Av Halvor Aarnes
Publisert 3. feb. 2011 14:43 - Sist endret 3. feb. 2011 14:43