Acetyl-CoA er en aktiv form av acetat (saltet av eddiksyre) hvor en acetylgruppe er festet til koenzym A. Acetyl-CoA kobler sammen glykolysen og med trikarboksylsyresyklus.
Koenzym A (CoASH) består av B-vitaminet pantotensyre (vitamin B5) i amidbinding med beta-merkaptoetylamin koblet til 3-fosforylert ADP. Hydrolyse av den energirike tioesterbindingen er eksergonisk og frigir energi ca. -31.5 kJ/mol. I glykolysen gjennomgår pyruvat oksidativ dekarboksylering og danner acetyl-CoA i enzymkomplet pyruvat dehydrogenase.