For eksempel vann som bryter den kjemiske bindingen mellom to deler av et molekyl A-B:
\(A-B + H_2O \;\; \overrightarrow {hydrolase}\;A-OH + B-H\)
Eksempler på hydrolaser er glykosidaser (bryter bindingen mellom et sukker og resten av molekylet), fosfataser (fjerner fosfatgrupper fra et molekyl), esteraser (bryter en esterbinding. I overføring av nerveimpulser og muskelkontraksjon spiller enzymet acetylkolinesterase en fundamental rolle), og peptidaser (bryter peptidbindinger i proteiner og peptider). Lipase er en esterase som bryter bindingen mellom glycerol og fettsyrer i fett. Protein fosfataser er enzymer som hydrolyttisk fjerner en fosfatgruppe fra en aminosyre i et protein. Nukleotidaser er enzymer som hydrolyserer nukleotider slik at det dannes et nukleosid og et fosfation. Flere fosfataser virker i glukoneogenesen slik som glukose-6-fosfat fosfatase og fruktose-1,6-bisfosfat fosfatase.